紫外分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
紫外分光光度計的分析總誤差為雜散光引起的誤差和噪聲引起的誤差之和。紫外分光光度計分析測試的總誤差除了包括雜散光和噪聲(含基線平直度)引起的誤差,還有光譜帶寬、波長準(zhǔn)確度、試樣配制和操作等引起的誤差。因此,總誤差應(yīng)是雜散光、噪聲、基線平直度、光譜帶寬、波長準(zhǔn)確度、試樣配制和操作等多種誤差的總和。
以上誤差計算方法簡單、直觀,儀器設(shè)計者或分析工作者只要根據(jù)自己估算或?qū)嶋H測試的數(shù)據(jù)(或假設(shè)的數(shù)據(jù)),結(jié)合紫外分光光度計的性能技術(shù)指標(biāo)(雜散光、噪聲、基線平直度、芳寬等),并考慮分析測試者在樣品配制、處理、儀器操作等方面的誤差,就能估算出儀器對某項分析工作的分析誤差,是一種很實用的誤差計算方法。
分光光度法在分析領(lǐng)域中的應(yīng)用已經(jīng)有數(shù)十年的歷史,至今仍是應(yīng)用較廣泛的分析方法之一。隨著分光元器件及分光技術(shù)、檢測器件與檢測技術(shù)、大規(guī)模集成制造技術(shù)等的發(fā)展[f}-Al,以及單片機(jī)、微處理器、計算機(jī)和DSP技術(shù)的廣泛應(yīng)用,紫外分光光度計的性能指標(biāo)不斷提高。紫外分光光度計的光、機(jī)、電、算等任何一方面的新技術(shù)都可能再推動紫外分光光度計整體性能的進(jìn)步。在追求準(zhǔn)確、快速、可靠的同時,并向自動化、智能。